化學(xué)合成多肽固相合成切割方法

化學(xué)合成多肽固相合成切割方法
固相合成切割方法 

       固相合成完成之后，必須選擇合適的切割試劑將多肽從樹脂上切割下來，然后經(jīng)過冰乙醚沉淀，離心收集沉淀，經(jīng)過HPLC分離純化，冷凍干燥得到*后產(chǎn)品。由于選擇的樹脂不同，氨基酸序列不同，(化學(xué)合成多肽)在切割時(shí)候，選擇的切割方法也不完全相同，一般都是選擇酸性條件下切割的條件，對(duì)于PAM，MBHA樹脂，一般采用HF切割，切割過程中需要添加對(duì)甲苯酚，對(duì)巰基苯酚，苯甲醚等試劑。而對(duì)于Wang，Rink-Amide，Trt樹脂，一般采用TFA切割，切割過程中加入，乙二硫醇，苯甲硫醚，水，三異丙基硅烷，苯酚等。這些添加試劑主要作為碳正離子俘獲試劑使用，(化學(xué)合成多肽)目的是俘獲切割反應(yīng)過程中生成的碳正離子，減少這些碳正離子對(duì)部分氨基酸側(cè)鏈的進(jìn)攻導(dǎo)致的副反應(yīng)，比較容易產(chǎn)生副反應(yīng)的氨基酸有：Trp，Tyr。切割試劑用量一般10-15ml/g樹脂。常用的切割配比：HF/p-cresol/p-thiocresol（90/5/5），TFA/TIS/EDT/H2O（94/1/2.5/2.5），反應(yīng)一般是在室溫條件下2h-4h。

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