Immortalized Human Corneal Endothelial Cells (IHCE)

Immortalized Human Corneal Endothelial Cells (IHCE) T0577

永生化人角膜內皮細胞(IHCE) 上海 安徽 合肥 ABM細胞庫

15000元  貨期2周

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BioSafety Level	II
Organism	Homo sapiens
Source Organ	Descemets′ membrane
Donor Gender	Male
Growth Properties	Adherent
Morphology	Cobblestone-like
Recommended Seeding Density	Thaw entire contents into an appropriate T25 flask as specified in the Propagation instructions.
Markers	CX43, ZO-1, 9.3E
Applications	For Research Use Only
Immortalization Method	Serial passaging and transduction with retroviruses carrying human papillomavirus type 16 E6/E7 gene
Description	The role of the corneal endothelium is to regulate corneal hydration, and dysfunction of this critical cellular layer will gradually result in corneal opacification and eventually results in loss of vision and corneal blindness. Established using the HPV16 E6/E7 genes, The Immortalized Human Corneal Endothelial Cells (IHCE) not only retains its authentic cell biomarkers (CX43, ZO-1 and 9.3E), it also displays fairly disomic cytogenetic status at chromosomes 1, 8, 10 and 18, which is an indication of normal diploid chromosomal status. Together with the Immortalized Human Corneal Keratinocytes (T0579) and the Immortalized Human Corneal Fibroblasts (T0578) isolated from the same donor and immortalized using the same platform, this uniform model system presents a valuable tool for studies involving cornea homeostasis and ophthalmologic diseases.
Procedure Overview
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Propagation	Use of PriCoat? T25 Flasks (G299) or Applied Cell Extracellular Matrix (G422) is required for cell adhesion to the culture vessels. Grow cells in ECM-coated culture vessels with the following conditions. The base medium for this cell line is PriGrow I (TM001). To make the complete growth medium, add the following components to the base medium: 10% fetal bovine serum (TM999), 5 mg/L human insulin (Z101065), 10 μg/ml transferrin, 3 ng/ml sodium selenite, 10 nM hydrocortisone, 10 nM β-estradiol, 10ng.ml VEGF, 10ng/ml hEGF, 10ng/ml Heparin, 1% L-glutamine and 1% Penicillin/streptomycin (G255). Atmosphere: air: 95%, CO2: 5%; Temperature: 37.0°C.
Preservation	1. Freeze Medium: Complete growth medium with 20% FBS and 10% DMSO. 2. Storage Temperature: Liquid nitrogen vapour phase.
Quality Control	1) RT-PCR was used to evaluate the transgene expression of HPV16 E6/E7; 2) Indirect immunofluorescence was performed to detect the cell specific marker expression CX43, ZO-1 and 9.3E; 3) FISH was used to examine the cytogenetic alterations in the immortalized cells.
Disclaimer
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