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CAS號(hào)查詢: 化合物定制合成; 小分子定制合成; 卡賓產(chǎn)品; 催化劑/配體; 定制現(xiàn)貨; 糖氨基酸; 現(xiàn)貨

多肽合成定制: 二肽/環(huán)二肽; 現(xiàn)貨多肽; top產(chǎn)品; 目錄肽; 多肽合成; 多肽定制服務(wù); 科研藥物肽目錄肽; 客戶肽定制; 多肽文庫(kù)構(gòu)建

多肽修飾服務(wù): 多肽修飾：Modification; 多肽修飾：Special amino acid; 多肽修飾：Spacer Linker; 多肽修飾：N-Methyl amino acid; 多肽修飾：Phosphorylation; 多肽修飾：Fluorescence/Dye Labeling; 多肽修飾：Isotope label; 多肽修飾：Cyclic peptide; 多肽修飾：Quenched fluorescent peptide; 多肽修飾：MAPS and Carrier Complex

生化試劑: PEG衍生物; 轉(zhuǎn)染試劑; 熒光探針，標(biāo)記，顆粒和染色; 酶與輔酶; 去垢劑; 微粒; 染色劑和指示劑; 質(zhì)粒

細(xì)胞生物學(xué): 無血清快速細(xì)胞凍存液; DSMZ標(biāo)準(zhǔn)菌株; ATCC標(biāo)準(zhǔn)菌株; 感受態(tài)細(xì)胞; JCM(RIKEN-BRC)標(biāo)準(zhǔn)菌株; 菌種保藏中心; 永生化細(xì)胞; 原代細(xì)胞; KCLB; 標(biāo)準(zhǔn)菌株

抗體: 雜交瘤融合篩選; 功能性目錄抗體; 免疫球蛋白; 未標(biāo)記二抗; HRP標(biāo)記二抗; Biotin標(biāo)記二抗; FITC標(biāo)記二抗; AU標(biāo)記二抗; PE標(biāo)記二抗; DyLight標(biāo)記二抗

蛋白質(zhì)科學(xué): 基因編輯服務(wù); 超敏熒光染料; 蛋白標(biāo)記與偶聯(lián); 重組蛋白

分子生物學(xué): 病毒包裝試劑; Human IgE ELISA Kit; Human IgA ELISA Kit; cGMP ELISA Kit; cAMP ELISA Kit; siRNA; shRNA; miRNA; miRNA質(zhì)粒; 慢病毒

實(shí)驗(yàn)耗材: 保存管; 試劑瓶; PCR; RAININ LTS移液器吸頭; BIOLOGIX手套; BIOLOGIX深孔板; BIOLOGIX玻片盒; BIOLOGIX試管/試管蓋; BIOLOGIX量杯; BIOLOGIX試劑槽

技術(shù)支持

DNA實(shí)驗(yàn)技術(shù)：哺乳動(dòng)物中制備基因組DNA實(shí)驗(yàn)

標(biāo)簽：哺乳動(dòng)物基因 DNA

在DNA提取過程中應(yīng)盡量避免使DNA斷裂和降解的各種因素，以保證DNA的完整性，為后續(xù)的實(shí)驗(yàn)打下基礎(chǔ)。一般真核細(xì)胞基因組DNA有107-9bp，可以從新鮮組織、培養(yǎng)細(xì)胞或低溫保存的組織細(xì)胞中提取，常是采用在EDTA以及SDS等試劑存在下用蛋白酶K消化細(xì)胞，隨后用酚抽提而實(shí)現(xiàn)的。

實(shí)驗(yàn)方法

制備DNA

實(shí)驗(yàn)材料	動(dòng)物組織
試劑、試劑盒	PBS 乙酸銨乙醇酚氯仿異戊醇 TE
儀器、耗材	離心機(jī) 搖床研缽
實(shí)驗(yàn)步驟	1. 切下組織并立即剪成小塊，置于液氮中凍結(jié)。 2. 將200 mg~1 g 的組織用預(yù)冷的研缽和研杵研碎，或用錘子將其搗為細(xì)粉末，每100 mg 組織用1. 2 ml 消化緩沖液懸浮。 3. 500 g 離心細(xì)胞5 min，棄上請(qǐng)。貼壁生長(zhǎng)細(xì)胞先用胰酶消化。 4. 細(xì)胞用1~10 ml 冰冷的PBS重懸，500 g 離心5 min，棄上清，重復(fù)1次。 5. 用1體積的消化緩沖液重懸細(xì)胞。 6. 將樣品在蓋緊的管中于50℃搖蕩下溫育12~18 h。 7. 用等體積的酚/氯仿/異戊酵抽提樣品，1 700 g 離心10 min。 8. 如果樣品溶解得不好，再加1體積不含蛋白酹K的消化緩沖液，并重復(fù)離心。 9 如果在界面上有一層厚的白色物質(zhì)，重復(fù)有機(jī)抽提，將上層（水溶液）轉(zhuǎn)移至一個(gè)新管中。 10. 加入1/2體積7.5 ml 乙酸銨和2體積100%乙醉，1 700 g 離心2 min。 11. 用70%乙酵洗滌，晾干，沉淀用TE。 12. 緩沖液重新溶解，使終濃度在約1 mg/ml 左右合肥合肥星肽生物科技有限公司

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